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CCK8試劑盒日本同仁常見問題解答(一) CCK8試劑盒日本同仁是常用的試劑盒之一，很多客戶在使用時都會有一些疑問，北京沃比森整理總結一些常見的問題，希望給大家一些參考和借鑒。1、一個孔中應接種多少個細胞?當使用標準96孔板時，貼壁細胞的zui小接種量至少為1,000個/孔(100μl培養(yǎng)基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低于2,500個/孔(100μl培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗，請先計算每孔相應的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。2、CCK8試劑盒日本同仁能否... 查看詳情 2015-01-27
GelRed核酸染料的產品特性 GelRed核酸染料產品特性：1.高靈敏度GelRed和GelGreen是目前市場中zui靈敏的凝膠核酸染料2.GelRed核酸染料更安全艾姆斯氏試驗結果表明，該染料的誘變性遠小于溴化乙錠(EB)3.穩(wěn)定性*可以使用微波爐加熱，可以在室溫下保存4.信噪比高樣品熒光信號強，背景信號低。5.GelRed核酸染料有廣泛的適應性適用于預制凝膠和凝膠電泳后染色6.染色過程簡單與EB一樣，在預制膠和電泳過程中不必擔心染料降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗，即可直接用紫外... 查看詳情 2015-01-21
脂質體2000轉染DNA的操作過程脂質體2000適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細胞中，是目前條件下zui方便的轉染方法之一。轉染率高，優(yōu)于磷酸鈣法，比它高5~100倍，能把DNA和RNA轉染到各種細胞。用脂質體2000進行轉染時，首先需優(yōu)化轉染條件，應找出該批LR對轉染某一特定細胞適合的用量、作用時間等，對每批LR都要做：先要固定一個DNA的量和DNA/LR混合物與細胞相互作用的時間，DNA可從1~5μg和孵育時間6小時開始，按這兩個參數(shù)繪出相應LR需用量的曲線，再選用LR和DNA兩者*的劑量，確定出轉染... 查看詳情 2015-01-13
HyClone胎牛血清培養(yǎng)平滑肌細胞的兩種方法 HyClone胎牛血清培養(yǎng)血管平滑肌細胞常用的方法有貼塊法(explant)和酶解離法(enzymedisperse)。下面一起來看下這兩種方法。1、貼塊法方法：動物經頸動脈放血后，在無菌操作下迅速取出胸腹主動脈段，置于含Hank's液的平皿中漂洗3次，將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層，然后縱行切開血管，刮除內膜即內皮細胞迅速撕下中膜內、中層，切成約1mm寬的小條，浸泡在含血清的Hank's液中，并將撕下小組織塊種植于培養(yǎng)瓶壁。置于37℃恒溫箱，2h左右，取出培養(yǎng)瓶加入20... 查看詳情 2015-01-06
纖維素酶的性質及作用機理詳解纖維素酶分子的大小因來源不同而不盡相同，三大類酶分子量一般在23Kda～146Kda之間。多數(shù)真菌和少數(shù)細菌的纖維素酶都受糖基化，糖基與蛋白之間以共價鍵結合，或呈可解離的絡合狀態(tài)。糖基化作用在一定程度上保護酶免受蛋白酶的水解，而纖維素酶正是由于糖基化，使其所含碳水化合物的比率在不同酶之間發(fā)生差異，導致酶的多形式和分子量的差別。通過比較分析，人們發(fā)現(xiàn)許多不同纖維素酶間表現(xiàn)出一定的同源性，且纖維素酶分子普遍具有類似的結構。由球狀的催化結構域(CD)、連接橋和纖維素結合結構域(CB... 查看詳情 2014-12-20
瓊脂糖凝膠電泳實驗之凝膠制作與點樣一、瓊脂糖凝膠制作1、瓊脂糖凝膠濃度配制凝膠的濃度據實驗需要而變，一般在0．8％～2．0％之間，如果一次配制凝膠100ml，沒用完的凝膠可以再次融化，但隨著融化次數(shù)的增加，水分丟失也越多，凝膠濃度則會越來越高，導致實驗結果不穩(wěn)定，補水辦法：一是在容器上標記煮膠前的刻度，煮膠后補充相應的水分至原刻度；二是在煮膠前稱重，煮膠后補充水至原重量。粗略一點的方法是通過多次較恒定的煮膠條件得出一個經驗補水值。以保證凝膠濃度基本維持在原濃度。核酸染色劑溴化乙錠(ethidiumbromid... 查看詳情 2014-12-10

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