無(wú)血清細(xì)胞凍存液不含動(dòng)物血清成分，能夠減少細(xì)胞受到污染的風(fēng)險(xiǎn)，提高細(xì)胞凍存的安全性，能夠有效保護(hù)細(xì)胞在凍存過(guò)程中的存活率，減少凍存損傷，確保細(xì)胞復(fù)蘇后的活性和功能，適用于各種動(dòng)物及人的細(xì)胞系和原代細(xì)胞。
 

　　無(wú)血清細(xì)胞凍存液的測(cè)定步驟：
 

　　-選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，用相應(yīng)的培養(yǎng)基將細(xì)胞懸浮起來(lái)。
 

　　-進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞數(shù)量足夠。
 

　　-將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管中，離心(通常800rpm，2分鐘)以去除上清液。
 

　　-加入適量的無(wú)血清培養(yǎng)基或PBS緩沖液，重懸細(xì)胞沉淀，再次離心洗滌，以去除殘留的培養(yǎng)基和血清成分。
 

　　-根據(jù)細(xì)胞數(shù)量，加入適量的無(wú)血清細(xì)胞凍存液，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞與凍存液充分接觸。
 

　　-將含有細(xì)胞的凍存液分裝至凍存管中，每管體積適中(如500μl-1000μl)，并做好標(biāo)記。
 

　　-將凍存管放入-80°C冰箱中保存，約24小時(shí)后可轉(zhuǎn)入液氮罐中長(zhǎng)期保存。
 

　　無(wú)血清細(xì)胞凍存液的使用注意事項(xiàng)：
 

　　-不同的細(xì)胞類(lèi)型可能對(duì)凍存液的成分有不同的要求，因此應(yīng)選擇適合目標(biāo)細(xì)胞類(lèi)型的。
 

　　-凍存液的濃度對(duì)凍存效果有重要影響，應(yīng)嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)或?qū)嶒?yàn)方案的要求進(jìn)行配制和使用。
 

　　-在操作過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，防止微生物污染。
 

　　-使用的凍存管、離心管等耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)嚴(yán)格消毒處理。
 

　　-凍存時(shí)應(yīng)控制好降溫速度，避免過(guò)快或過(guò)慢降溫導(dǎo)致細(xì)胞損傷。
 

　　-一般來(lái)說(shuō)，先將凍存管放入-80°C冰箱中預(yù)冷一段時(shí)間(如24小時(shí))，然后再轉(zhuǎn)入液氮罐中長(zhǎng)期保存。
 

　　-在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞名稱(chēng)、凍存日期等信息，以便后續(xù)查找和使用。
 

　　-凍存液中可能含有對(duì)細(xì)胞有毒的成分(如DMSO)，在操作過(guò)程中應(yīng)注意個(gè)人防護(hù)和環(huán)境保護(hù)。
 

　　-避免凍存液接觸皮膚和眼睛，如不慎接觸應(yīng)立即用清水沖洗并就醫(yī)。