N2添加劑(100X)是一種經(jīng)過濾除菌的濃縮型細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,常用于神經(jīng)元、神經(jīng)干細(xì)胞等的培養(yǎng)。
-樣品準(zhǔn)備:將N2添加劑(100X)用基礎(chǔ)培養(yǎng)基(如Neurobasal或DMEM)稀釋至1X工作濃度。例如,配制100ml培養(yǎng)基時,取1ml N2添加劑加入99ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基中混合均勻。
-檢測方法:若需測定氮氣含量(如食品包裝應(yīng)用),可采用氧化鋯傳感器等專業(yè)設(shè)備進(jìn)行定量分析,確保密封性或工藝質(zhì)量符合要求。
-用途限制:僅限科研使用,禁止用于臨床診斷、治療或食品/藥品領(lǐng)域。
-操作規(guī)范:實驗時需穿戴實驗服和一次性手套,避免直接接觸皮膚或誤食。
-保存條件:未開封產(chǎn)品需在4℃避光保存,有效期通常為一年;稀釋后的1X培養(yǎng)基建議在2-8℃避光保存,并在兩周內(nèi)使用完畢。
-兼容性驗證:使用前需確認(rèn)與基礎(chǔ)培養(yǎng)基(如Neurobasal、DMEM)的相容性,并參考具體實驗方案調(diào)整配比。
N2添加劑(100X)通過準(zhǔn)確配比的生物活性成分模擬體內(nèi)微環(huán)境,支持神經(jīng)細(xì)胞存活與功能。其核心成分包括:
-胰島素:調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝,促進(jìn)葡萄糖攝取和蛋白質(zhì)合成,維持細(xì)胞能量平衡。
-轉(zhuǎn)鐵蛋白:負(fù)責(zé)鐵離子的運輸,防止氧化應(yīng)激損傷,同時參與細(xì)胞增殖調(diào)控。
-孕酮與腐胺:分別作為類固醇激素和多胺類物質(zhì),穩(wěn)定細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)并促進(jìn)神經(jīng)元突觸生長。
-Na2SeO2:通過抗氧化作用保護(hù)細(xì)胞免受自由基損傷,增強細(xì)胞存活率。
無血清培養(yǎng)的準(zhǔn)確調(diào)控:傳統(tǒng)血清培養(yǎng)基存在批次差異和潛在污染風(fēng)險,而N2添加劑通過摒棄動物血清,以化學(xué)成分明確的配方實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)。其100倍濃縮形式需按1:100比例稀釋至基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,確保營養(yǎng)成分的均一性和實驗可重復(fù)性。
適配特殊細(xì)胞需求:針對神經(jīng)細(xì)胞等脆弱類型,N2添加劑可與堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、表皮生長因子(EGF)等聯(lián)用,進(jìn)一步激活信號通路,促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞增殖或定向分化。