TC-100培養(yǎng)基是一種用于昆蟲(chóng)細(xì)胞體外培養(yǎng)的合成培養(yǎng)基,其工作原理基于為昆蟲(chóng)細(xì)胞提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境和必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),具體如下:
1.成分支持
-能源物質(zhì):含有葡萄糖,作為細(xì)胞的主要能量來(lái)源,通過(guò)細(xì)胞呼吸作用產(chǎn)生ATP,為細(xì)胞的各種生理活動(dòng)提供能量。同時(shí)省略了蔗糖、果糖和Kreb循環(huán)中間產(chǎn)物,這是對(duì)Grace培養(yǎng)基的優(yōu)化,更有利于桿狀病毒毒粒的生產(chǎn)。
-氨基酸與肽類(lèi):添加了L -谷氨酰胺等氨基酸以及胰蛋白胨。L -谷氨酰胺是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的重要原料,參與細(xì)胞內(nèi)多種生物活性分子的構(gòu)建;胰蛋白胨則提供了豐富的多肽和氨基酸混合物,為細(xì)胞生長(zhǎng)提供了必要的氮源和生長(zhǎng)因子。
-無(wú)機(jī)鹽與緩沖系統(tǒng):碳酸氫鈉作為pH緩沖劑,維持培養(yǎng)基的pH值在6.0 -6.4之間,確保細(xì)胞在適宜的酸堿環(huán)境中生長(zhǎng)。此外,還含有多種無(wú)機(jī)鹽,如鈉、鉀、鈣、鎂等離子,這些離子對(duì)于維持細(xì)胞的滲透壓平衡、酶的活性以及細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)等方面都起著關(guān)鍵作用。
-維生素:多種維生素的存在對(duì)于細(xì)胞的正常代謝至關(guān)重要。例如,某些維生素可以作為輔酶參與細(xì)胞內(nèi)的氧化還原反應(yīng),促進(jìn)碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)的代謝,從而保證細(xì)胞能夠有效地利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行生長(zhǎng)和分裂。
2.環(huán)境適應(yīng)性
-溫度與氣體環(huán)境:通常在28℃下培養(yǎng)昆蟲(chóng)細(xì)胞,這個(gè)溫度接近昆蟲(chóng)體內(nèi)的自然環(huán)境溫度,有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。同時(shí),需要一定的二氧化碳濃度(約4.5)來(lái)維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定,因?yàn)槎趸伎梢耘c碳酸氫鈉形成緩沖對(duì),調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的酸堿度,使其適合昆蟲(chóng)細(xì)胞的生長(zhǎng)需求。
-滲透壓調(diào)節(jié):滲透壓介于342 -367mOsm/kg,這一范圍與昆蟲(chóng)細(xì)胞內(nèi)的滲透壓相近,能夠防止細(xì)胞因滲透壓過(guò)高或過(guò)低而受到損傷,保證細(xì)胞內(nèi)外的物質(zhì)交換和水分平衡,使細(xì)胞能夠在穩(wěn)定的滲透環(huán)境中正常生長(zhǎng)。